达乌里胡枝子根际解磷细菌的筛选、鉴定及特性研究

黄 臣， 杨凯元， 高 鹏， 梁银萍， 韩玲娟， 赵 祥

(山西农业大学草业学院, 山西 太谷 030801)

达乌里胡枝子(Lespedezadaurica)为豆科(Leguminosae)胡枝子属(Lespedeza)的多年生草本状半灌木，又称兴安胡枝子、牤牛茶、牛枝子，广泛分布于东亚的日本、韩国以及我国的东北、华北、西北、华中、西南等地区，在干旱、寒冷、贫瘠的生境下生长。达乌里胡枝子茎叶鲜嫩、蛋白质含量高、适口性佳，可作为优良的青饲料；其主根粗壮，侧根发达，并具根瘤，能够进行生物固氮，是半干旱地区退化草地改良的先锋植物，具有较高的经济和生态价值[1]。

晋北黄土高原地区是我国北方重要的生态屏障[2]，但该地区土壤养分贫瘠，草地生产力低下[3]，尤其磷素严重亏缺，导致天然草地存在不同程度的退化风险，选择乡土草进行退化草地改良是晋北黄土高原生态修复的主要途径。磷参与植物组织内物质构成、能量合成及细胞分裂等过程，是植物生长代谢的必需营养元素之一[4]。土壤缺磷限制了豆科植物根瘤菌的形成，降低其固氮效率和对矿物质元素的吸收，进而对作物产量与品质造成不利影响[5-7]。达乌里胡枝子是黄土高原的乡土植物，但该地区土壤磷含量严重亏缺，0～20 cm土壤全磷含量平均为0.63 g·kg-1[8]，达乌里胡枝子生长长期受到当地磷养分限制，磷匮乏是限制当地退化草地改良和矿区生态修复中达乌里胡枝子生长的重要因子[9]，极大制约其生态价值与经济价值的增长。当前，施加磷肥是缓解土壤缺磷的主要手段，但存在成本高、利用效率低，且易造成环境面源污染和土壤酸化板结等问题[10-11]，而微生物在土壤物质和能量循环中发挥着至关重要的作用，其中解磷菌(Phosphate-solubilizing microorganisms，PSM)可将土壤中难溶性磷转化为被植物吸收的有效磷[12]。植物通过根系招募解磷菌等方式加速土壤磷转化，保证其生长过程中对磷的需求。近年来，随着国家生态环境保护和绿色农业等政策的实施，挖掘新的促生菌剂、开发微生物肥料受到重视，解磷菌具有广阔的应用前景[13]。

迄今为止，国内外已从豆科等植物根际分离、筛选到的解磷菌有二十多个属，主要包括假单胞菌属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)、伯克霍尔德菌属(Burkholderia)、根瘤菌属(Rhizobium)、沙雷氏菌属(Serratia)、不动杆菌属(Acinetobacter)和肠杆菌属(Enterobacter)等。此外一些真菌，如根霉属(Rhizopus)也被发现具有解磷功能[14-15]。目前，针对胡枝子属植物根际微生物的研究较多，内容主要包括促生菌的分离、鉴定和功能验证，以及在矿区和退化草地生态修复中的应用。例如，胡枝子属植物根瘤内生菌与水稻(Oryzasativa)叶片内生菌共同接种，可显著促进大豆结瘤，提高根瘤固氮效率[16]。截叶铁扫帚(Lespedezacuneata)根瘤中分离出1株对铜、镉、铅和锌等重金属具有高抗性的菌株CCNWRS33-2，并表现出较好的重金属富集能力[17]；二色胡枝子(Lespedezabicolor)根际分离出1株阮杆菌属Nguyenibacter菌株，可通过分泌葡萄糖酸，减轻铝对植物的毒害[18]。关于达乌里胡枝子根际促生菌的研究相对较少，仅有胡志伟[19]报道了从其根际分离出1株具有解磷功能的促生菌，相关系统研究尚未开展。

因此，本研究通过对达乌里胡枝子根际土壤微生物进行分离，筛选出高效、抗逆性强，且具有促生作用的解磷菌，并初步探讨其解磷机制，以期为后续研发适合于晋北黄土高原地区建植胡枝子使用的解磷菌剂提供菌种资源。

1 材料与方法1.1 土壤样品采集

2021年8月，研究地为山西省晋中市太谷区晋农一号达乌里胡枝子种植田(112°60′E，37°44′ N)。在对角线上设置5个1 m×1 m的样方，每个样方内，用75% 酒精表面消毒的铁铲挖取长×宽×高为40 cm×20 cm×20 cm的达乌里胡枝子根系土坯，放置于无菌自封袋中，于4℃便携式冷藏箱中保存并带回实验室，进行土壤根际土的分离。

1.2 供试培养基

使用Pikovaskaias(PKO)无机磷培养基、蒙金娜有机磷培养基进行解磷菌的分离[20]，使用LB培养基进行解磷菌的常规培养[20]，淀粉琼脂培养基用于测定淀粉水解试验[21]，明胶培养基用于明胶液化测试[21]，葡萄糖蛋白胨水培养基用于甲基红测试[21]，CAS培养基用于解磷菌铁载体分泌能力测定[22]，葡萄糖蛋白胨培养基用于解磷菌有机酸分泌能力测定[23]。

1.3 达乌里胡枝子根际有效解磷菌的初筛

1.3.1土壤或植物稀释液的制备 将根际分为4个区域，即非根际(Soil away from roots，NRS)、根际(Soil adhering to roots，RS)、根系表面(Rhizoplan of roots，RP)和根内(Histoplan of roots，HP)。将田间采集的达乌里胡枝子根系土坯轻轻压裂并抖落获得非根际土壤，然后用灭菌毛刷轻轻刷落根际表面土壤获得根际土，将非根际土、根际土和植物根系置于无菌自封袋中，置于4℃条件下保存[20]。取5 g非根际土置于盛有45 mL 0.85%灭菌生理盐水的离心管中，振荡器(HY-2型、力辰科技有限公司)上200 r·min-1振荡30 min，静置收集上清液，即为浓度10-1的NRS稀释液；取0.5 g根际土放入盛有4.5 mL 0.85%灭菌生理盐水的离心管中，高速离心机800 r·min-1离心2 min，静置收集上清液即为浓度10-1的RS稀释液；取植物根系1 g，无菌水冲洗，放入盛有9 mL 0.85%灭菌生理盐水的离心管中，加入灭菌小钢珠，在高速离心机1 000 r·min-1离心10 min，静置收集上清液即为浓度10-1的RP稀释液；将离心过的根系用75%酒精浸泡30 s，放入2%的次氯酸钠(NaClO)溶液中处理5 min，无菌水冲洗3次，无菌滤纸吸干根系表面水分，置于研钵中研磨，用9 mL 0.85%灭菌生理盐水分3次冲洗研钵，将研钵中的生理盐水连同根系一同转入离心管中，高速离心机1 500 r·min-1离心5 min，上清液即为浓度10-1的HP稀释液。通过梯度稀释方法依次制备10-2,10-3,10-4和10-5的达乌里胡枝子根际4个区域的稀释液[20]。

1.3.2解磷菌的分离 分别吸取上述4个区域浓度为10-3,10-4和10-5的稀释液50 μL，用灭菌玻璃涂布棒涂布于蒙金娜固体培养基，倒置放入温度为28℃的培养箱中黑暗培养。待单个菌落出现后，挑取培养基上形成明显透明圈的菌落置于LB固体培养基上进行分区划线，重复多次，直至获得纯菌株。将具有解有机磷能力的菌株接种在PKO固体培养上，观察是否可形成明显透明圈，即是否具有解无机磷的能力。

1.3.3有效解磷菌的初筛 将兼具解有机磷和无机磷的菌株接种于LB培养基上活化，培养48 h后刮取菌落制备菌悬液，吸取5 μL悬浮液(OD600=2)接种于PKO无机磷固体培养基和蒙金娜有机磷固体培养基上。为避免培养基性状对菌株生长造成影响，使用培养基分装器(P17型、重庆江雪科技有限公司)向每个培养皿定量分装20 mL培养基。每个菌株5个重复，在第7 d分别用十字交叉法测定各菌株形成的透明溶磷圈直径(D)和菌落直径(d)，根据D/d值(可溶性指数值)的大小对有效解磷菌进行初筛。

1.4 菌种鉴定

1.4.1菌落及菌体形态观察 将筛选出的菌株接种于LB培养基上培养48 h，观察菌落形状、颜色等特征，并进行革兰氏染色，使用光学显微镜(BX51型、日本Olympus公司)观察菌体形态。

1.4.2菌株生理生化反应 对已筛选出的菌株进行明胶液化[24]、淀粉水解[24]、甲基红试验[24]、过氧化氢酶反应[21]测定。

1.4.3解磷菌株生长曲线的测定 将解磷菌株分别接种到LB液体培养基，37℃，180 r·min-1培养12 h，使用分光光度计调整菌液浓度至OD600=0.1用于接种。在100 mL LB液体培养基中接种5 mL OD600=0.1的菌液，30℃，180 r·min-1恒温震荡培养26 h，每隔2 h监测一次OD600值并记录，观测菌株的生长状况并绘制生长曲线。

1.4.416S rDNA序列测定与系统发育分析 筛选出有效解磷菌株的鉴定采用 16S rDNA基因序列比对。使用20 μL移液枪头沾取少量菌液，置于盛有20 μL无菌水的PCR八连排管中进行PCR扩增，通用引物采用27F(5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)和1492R(5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′)，PCR反应体系(50 μL)为2×Taq Master Mix 25 μL，上、下游引物(10 μmol·L-1)各2 μL，DNA模板2 μL，ddH2O19 μL。PCR反应程序为94℃预变性3 min；94℃变性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸1 min，循环30 次；最后72℃延伸5 min。扩增产物送生工生物工程上海股份有限公司测序。将测得的 16S rDNA序列在NCBI数据库中注册，获得登录号。

1.5 达乌里胡枝子根际解磷菌解磷能力及其磷酸酶活性的测定

1.5.1解有机磷(卵磷脂)能力的定量测定 将解磷菌株接种于LB培养基上活化，吸取1 mL悬浮液(OD600=0.8)接种于60 mL的蒙金娜液体培养基中，重复3次，接种无菌水为对照，置于28℃,180 r·min-1的振荡培养箱(ZQLY-180E型、上海知楚仪器有限公司)中黑暗培养5 d，在涡旋仪(MX-S型、大龙兴创实验仪器有限公司)上混匀5 min，取10 mL培养液，10 000 r·min-1高速离心15 min，取出上清液采用“钼锑抗比色法”测定有效磷(Available phosphorus,AP)含量，确定菌株解有机磷的能力，使用pH计对上清液的pH值进行测定[12]。

1.5.2磷酸酶活性的测定 采用碱性及酸性磷酸酶试剂盒(购自北京索莱宝科技有限公司)对1.5.1中获得的上清液的磷酸酶活性进行测定。主要步骤如下，37℃，遮光条件下与上清液作用15 min后，每毫升上清液每分钟催化产生1 μmol的酚定义为1个酶活力单位。

1.5.3解无机磷(磷酸钙)能力的测定 以磷酸钙为磷源，对有效解磷菌解无机磷的能力进行定量测定，方法同1.5.1。

1.6 达乌里胡枝子根际解磷菌抗逆特征

1.6.1高低温耐受性 将活化的解磷菌接种于LB培养基中，置于4℃，20℃，28℃，37℃，60℃培养箱中培养72 h，观察、记录菌株的温度适应性，并采用“十字交叉法”测定菌株直径，重复3次。

1.6.2耐盐性 分别调整LB培养基的NaCl浓度值0%，1%，2%，5%，7%，10%，培养、观察、记录菌株耐盐性，并采用“十字交叉法”测定菌株直径，每个处理3次重复。

1.6.3耐酸碱性 通过0.1 mol·L-1NaOH，0.1 mol·L-1HCl溶液调整LB培养基pH值，分别为pH5，pH6，pH7，pH8，pH9，pH10，pH11，pH12，重复3次，培养、观察、记录菌株耐酸碱性。

1.7 达乌里胡枝子根际解磷菌促生特性

对筛选菌株进行分泌铁载体能力[22]、产有机酸能力[23]和吲哚反应测定[21]。

1.8 数据分析

利用Microsoft excel 2019整理数据，使用SPSS 20.0进行数据分析，对不同菌株的可溶性指数、液体培养基中有效磷含量、磷酸酶活性以及促生特性进行单因素方差分析和LSD法多重比较(P<0.05)。采用Origin 2021 统计软件绘制解磷菌解磷能力的柱状图，使用MEGA X软件将序列与NCBI数据库中的相近序列进行系统发育分析，采用邻接法(Neighbor-Joining method)构建系统发育树，自展值(bootstrap)为1 000次。

2 结果与分析2.1 达乌里胡枝子根际解磷菌的初筛

如表1所示，利用蒙金娜和PKO培养基从达乌里胡枝子根际土壤中非根际土、根际土、根表、根内分别筛选、纯化出3株、8株、15 株、1株具有解有机磷能力的菌株，其中可溶性指数≥1.50的菌株有9株，分别为DP7，DP12，DP15，DP20，DP22，DP25，DP26，DP27，DP28，DP29。如图1b，图1c所示，DP24，DP25，DP27和DP28菌株兼具解无机磷的能力，解有机磷可溶性指数在1.50～2.06，初步确定为有效解磷菌。

表1 解磷菌解磷可溶性指数Table 1 Solubility index of PSM

图1 解磷菌形态特征及解磷能力Fig.1 Morphological characteristics and phosphate-solubilizing ability of PSM注：a为解磷菌形态学特征；b为解无机磷能力；c为解有机磷能力Note:a is morphological characteristics of PSM;b is inorganic phosphorus-solubilizing ability;c is organic phosphorus-solubilizing ability

2.2 达乌里胡枝子根际解磷菌的鉴定

2.2.1形态学特征 4株有效解磷菌菌落形态特征如图1(a)所示，DP24，DP25和DP27在LB固体培养基上生长48 h后菌落直径分别约为6.69 mm，5.48 mm，4.94 mm，2.71 mm；菌落均呈凸起状，边缘整齐；菌落颜色分别为黄色、乳黄色和乳白色。4株有效解磷菌的细胞形态如图2所示，DP24的细胞呈长杆状，大小为(1.25～2.38) μm×(0.25～0.34) μm；DP25和DP27均为球杆状，大小分别为(0.85～1.38) μm×(0.67～0.79) μm、(0.71～1.00) μm×(0.52～0.73) μm。DP28在LB固体培养基上生长48 h后，菌落形态也呈凸起状，表面湿润，但边缘不整齐，呈齿状；颜色为乳白色，细胞呈球状，大小为(0.55～0.70) μm×(0.51～0.66) μm。

图2 4株解磷菌革兰氏染色结果Fig.2 Gram staining of four PSM注：a为DP24革兰氏染色下解磷菌的菌体形态；b为DP25革兰氏染色下解磷菌的菌体形态；c为DP27革兰氏染色下解磷菌的菌体形态；d为DP28革兰氏染色下解磷菌的菌体形态Note:a is morphological of PSM by the strain DP24;b is morphological of PSM by the strain DP25;c is morphological of PSM by the strain DP27;d is morphological of PSM by the strain DP28

2.2.2生理生化特性 如图2所示，DP24,DP25和DP27的革兰氏染色均为阴性，DP28为阳性。4株解磷菌在明胶培养基中培养后均无液化现象，即为阴性反应，表明无水解明胶的能力；在4株解磷菌培养基上滴加碘液，菌落周围均呈蓝色，表明无水解淀粉的能力；在接种解磷菌的葡萄糖蛋白胨液体培养基中滴加甲基红指示剂，菌株DP24,DP25和DP27颜色无明显变化，为阴性反应，菌株DP28呈红色阳性反应；4株解磷菌的过氧化氢酶反应均产生气泡，为阳性反应，表明具有产生过氧化氢酶的能力，其中DP24和DP28过氧化氢酶反应最为强烈(表2)。

表2 解磷菌生理生化特性Table 2 Physiological and biochemical characteristic of PSM

2.2.3解磷菌的生长曲线 各菌株生长曲线均可分为三个时期，即指数生长期、平稳增长期和缓慢衰落期，菌株DP25,DP27在培养前18 h以指数倍数快速增长，8～24 h以平稳速度缓慢增长。菌株DP24,DP28在0～8 h和18～24 h内平稳速度缓慢增长，在培养8～20 h，以指数倍数快速增长(图3)。

图3 4株解磷菌的生长曲线Fig.3 Growth curve of four PSM

2.2.4分子生物学特性 解磷菌DP24(GenBank登录号:ON077029)、DP25(GenBank登录号:ON077030)、DP27(GenBank登录号:ON077031)、DP28(GenBank登录号:ON077032)的16S rDNA序列长度分别为1 439 bp，1 444 bp，1 440 bp，1 459 bp。通过NCBI数据库比对和系统发育树分析(图4)，DP24与假单胞菌属(Pseudomonassp.)(MW578922.1)的序列同源性最高，达到99.79%；DP25与DP27聚为一类，与不动杆菌属(Acinetobactersp.)(MZ430421.1)的序列同源性均达到99.79%；菌株DP28与表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)(MN511770.1)的序列同源性达到99.79%。结合形态学特征和生理生化特性，确定DP24为韩国假单胞菌(Pseudomonaskoreensis)；DP25和DP27为醋酸钙不动杆菌(Acinetobactercalcoaceticus)；DP28为表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)。

图4 菌株DP24，DP25，DP27和DP28基于16S rRNA基因序列同源性构建的系统发育树Fig.4 Molecular phylogenetic anylysis of strains DP24，DP25，DP27 and DP28 from 16S rRNA region

2.3 达乌里胡枝子根际解磷菌解有机磷磷能力及其磷酸酶活性

如图5 a所示，DP24，DP25，DP27和DP28在蒙金娜液体培养基中培养5 d后，DP25，DP27和DP28培养液的有效磷含量均显著高于对照(P<0.05)，分别较对照增加9.14 倍、8.92 倍、17.3 倍。DP24,DP27和DP28培养液的pH均显著高于对照(P<0.05)，分别较对照增加了3.37%，4.25%和7.32%(图5 b)。

培养5 d后，DP24，DP25，DP27和DP28培养液中的酸性磷酸酶活性分别较对照增加了2.34 U·L-1，9.77 U·L-1，16.61 U·L-1，12.14 U·L-1(P<0.05)；DP27和DP28分别较对照增加了29.93 U·L-1，25.95 U·L-1(P<0.05)。

图5 解磷菌对有机磷的解磷能力、pH及磷酸酶活性Fig.5 Phosphate-solubilizing ability,pH and phosphatase activity of PSM to organic phosphorus 注：不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下同Note:Different lowercase letters indicates significant difference at the 0.05 level. The same as below

2.4 达乌里胡枝子根际解磷菌解无机磷能力

如图6所示，DP24，DP25，DP27和DP28在PKO无机磷液体培养基中培养5 d后，DP25，DP27，DP28有效磷含量与对照差异显著，分别较对照增加了901.79 倍、931.13 倍和637.32 倍。DP25，DP27和DP28培养液的pH值均显著低于对照(P<0.05)，呈弱酸性，分别较对照降低了38.37%，32.70%和32.09%。

图6 解磷菌对无机磷的解磷能力及pH特征Fig.6 Inorganic phosphorus decomposition ability of PSM

2.5 达乌里胡枝子根际解磷菌的抗逆特性

如表3所示，DP25与DP27在4℃条件下均可生长，具有一定的耐低温能力，但均不具备在60℃条件下生长能力，不耐高温。耐盐性方面，DP28可在1%～10%含盐量条件下生长，耐盐性能最佳；DP24，DP25，DP27次之，最大耐盐量均为5%。耐酸碱方面，DP25，DP28在pH值为4～12条件下可以生长，耐酸碱性能最佳；DP24，DP27次之，菌株可耐受pH值区间分别为4～9和5～10。

表3 解磷菌对温度、盐分和酸碱度等逆境的抗逆特征Table 3 Temperature、salinity and pH of the PSM

2.6 达乌里胡枝子根际解磷菌的促生特性

如表4所示，D24，DP25，DP27均具有分泌铁载体能力，DP25，DP27分泌能力较强，DP28不具有分泌铁载体能力。4株有效解磷菌均具有分泌有机酸的能力，DP28分泌有机酸能力最强，其次为DP25，DP27。4株有效解磷菌在培养界面均无红色环出现，即不具有产生吲哚的能力。

表4 解磷菌的促生特性Table 4 Growth promoting characteristics of PSM

3 讨论

目前已报道胡枝子属植物的根际解磷菌主要包括伯克霍尔德菌属(Burkholderia)、根瘤菌属(Rhizobium)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、芽孢杆菌属(Bacillus)、微杆菌属(Microbacterium)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、肠杆菌属(Enterobacter)、泛菌属(Pantoea)等[25-26]。在胡枝子属植物根际解磷菌研究中尚未见不动杆菌属(Acinetobacter)、葡萄球菌属(Staphylococcus)相关报道，本研究从达乌里胡枝子根际筛选出上述两种菌株，发现具有较好的解磷能力，丰富了胡枝子属植物解磷菌资源库。目前，假单胞菌属(Pseudomonas)、醋酸钙不动杆菌(Acinetobactercalcoaceticus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)作为黄土高原植物的根际促生菌研究较多[27-29]，说明根际土壤微生物群落结构和组成受地域等因素的影响。此外，研究发现上述菌株在不同种类植物根际均有定殖现象，表明部分根际解磷菌具有较强的普遍适用性，可作为优质解磷菌资源用于后续微生物肥料的研发。

解磷能力是筛选解磷菌资源的基本标准，Zhang等[30]从红花根际筛选出的葡萄球菌属菌株RC03、不动杆菌属菌株RC04解无机磷量为112.5 mg·L-1,168.5 mg·L-1；Khanghahi等[32]从小麦根际筛选出的不动杆菌属菌株NT28解无机磷量为115.5 mg·L-1。本研究筛选的DP25,DP27,DP28解无机磷量可达478.48 mg·L-1，494.03 mg·L-1,338.30 mg·L-1，均比上述解磷菌株高，这可能是由于黄土高原地区土壤养分贫瘠，磷素含量低，使得植物根际释放信号招募解磷能力强的微生物[31]。

在本研究中发现菌株DP25,DP27在4℃低温和37℃高温条件下均可生长，这是其长期适应当地环境形成的特殊耐高低温能力[38]，在我国甘肃、四川等地均有发现[39-40]，预示其具有广泛的环境适应能力，可在除黄土高原地区以外的我国南、北方地区进行广泛应用。此外，研究表明醋酸钙不动杆菌可在含盐量0%～5%或pH值为8.5～10条件下生长[41]，葡萄球菌属微生物可在含盐量10%和pH值为10的条件下生长[42]。DP25,DP27和DP28亦具有较强耐盐和耐酸碱能力，其中DP28耐盐量可达10%，DP25，DP28在pH值为4～12条件下均可生长，而土壤盐渍化是山西省主要退化草地类型，盐渍化面积占全省总面积的9.7%[43]，因此上述菌株在山西盐渍化草地生态修复方面具有良好的应用潜力。本研究发现DP24,DP25,DP27还具有机酸和铁载体分泌能力。研究表明，大部分根际促生菌均能够分泌有机酸和对铁有亲和力的铁螯合物(即铁载体)[44]。细菌分泌的有机酸可协助植物溶解土壤中难溶性磷和钾，进而促进其生长[45]。铁载体是一种对Fe3+具有极强亲和力的低分子化合物，可与土壤中不可利用的Fe3+结合，是植物吸收利用铁素的主要途径[46]；同时通过这种方式消耗铁元素来与病原细菌竞争铁，从而降低一些土传细菌病害的发生[47]；此外，铁载体在调控土壤微生物磷代谢机制中也发挥重要作用[48]。综上所述，本试验初步认定DP25，DP27可作为潜在的根际促生菌资源，下一步的研究将进行盆栽与田间试验，验证菌株DP25，DP27对植物的促生效果。

4 结论

本研究从山西省黄土高原地区达乌里胡枝子根际土壤及根系表面分离、筛选到4株解磷菌株，其中3株为高效解磷菌株。初步鉴定菌株DP25，DP27均属醋酸钙不动杆菌(Acinetobactercalcoaceticus)，DP28属于表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)。不动杆菌属作为土壤中的常见优势菌群，在土壤中具有较强的定殖能力，有利于对菌种的后期开发利用。筛选出的表皮葡萄球菌具有较好的解磷、耐盐和耐酸碱能力，可作为微生物肥料研发菌种。下一步将通过盆栽试验，验证上述解磷菌对达乌里胡枝子植株根际的解磷性能及增产效果，为后续研发高效稳定的微生物磷肥提供科学依据，并在山西省黄土高原地区盐碱地、矿区等退化土地上进行推广应用，充分发挥达乌里胡枝子的生态和经济价值。